同时检测四种猪繁殖障碍病原的多重荧光定量PCR检测技术随着我国生猪养殖业发展,规模化猪场母猪淘汰最大原因的是繁殖障碍。以10000头基础母猪规模化原种猪场为例,按当前市场粗略估算繁殖障碍类疾病带来的经济损失,种猪淘汰率增加5%,后备猪淘汰率增加5.56%,损失的金额约400万,而针对疫病开展的病原检测和抗原抗体检测支出费用则需增加280万到500万不等(上述预估还不包括间接损失和营收损失),可见猪繁殖障碍类疾病带来的经济损失不容小觑。团队设计的猪繁殖障碍类病原检测方法,能在一小时内一次性检测四种相关病原(猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒)。该方法具有良好的灵敏度,猪圆环病毒2型、3型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒的检测限分别为1、10、10、10拷贝/反应;针对四个靶标所建立的标准曲线相关系数(R2)均大于0.997。同时,特异性检测结果表明所建立的方法对这4种病毒具有特异性,与其他常见感染猪只的病毒基因无交叉反应。此外,该方法具有良好的重复性,批内和批间变异系数小于2%。使用该方法对所收集的315个临床样本进一步进行临床应用评估,结果显示,我们设计的检测方法具有较好的实用性和准确性。1. 敏感性高:与常规的PCR及现有的荧光PCR检测技术相比较,具有更高的灵敏度。2. 适用范围广:对细胞培养物、血液、组织等多种样品DNA中的病毒进行快速检测。3. 临床指导作用强,能为猪繁殖障碍相关疾病的检测提供便利,开展每批次后备母猪的入群检测、每季度各阶段猪群的健康监测。完成研究方法的建立和不同临床样品测试,获批专利1项专利名称:同时检测四种猪繁殖障碍病原的多重荧光定量PCR引物和探针及其方法,授权公告号:CN114214458B荣获第八届中国创新挑战赛畜牧生猪技术专题赛“新技术、新产品”优秀奖